主要用途 细胞基质金属蛋白酶 1（MMP1）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过荧光探针 MCA 供体和 DAP/DNP 受体双重标记的多肽底物 PLGLAR，在特定抑制剂存在与否的情况下，受到 MMP1 蛋白酶的水解，解离抑 制基团，产生荧光产物，即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研 制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中基质金 属蛋白酶 1 的特异活性定量检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性 能稳定，安全可靠。

技术背景 基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases；MMPs）是一类结构高度同源的分泌型或膜相关性锌内肽酶的 总称，因含有金属（锌、钙）离子而得名。其功能在于分解细胞外基质成分。迄今为止发现的MMPs至少 有28种，几乎能降解除多糖以外的全部细胞外基质（extracellular matrix）成分，同时参与胚胎发育、形态 形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、组织再吸收（tissue re

sorption）、疾病发生，例如关节炎、癌细胞 浸入转移等。根据降解的底物不同可将MMPs分为4大类：（1）胶原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和蛋白多糖；（2）明胶酶（Ⅳ型胶原酶）：MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B， 主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原和弹性纤维；（3）基质溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11、MMP12， 主要作用于纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、弹力纤维、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ胶原及MMP1、MMP8、MMP9； （4）膜型金属蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明胶、Ⅳ型胶原、MMP2。体内 绝大多数细胞并不储备MMPs，当需要MMPs的信号传递到细胞后才临时合成，合成的MMPs以无活性的酶 原（proenzyme）形式分泌到细胞外，随后被多种蛋白酶和非蛋白酶水解以及热处理激活，一种激活的MMPs 可激活另一种MMPs，形成瀑布效应。基质金属蛋白酶-1，又称间隙性胶原酶 （interstitial collagenase）或 成纤维细胞胶原酶（fibroblast collagenase），其前体分子量为52（未糖基化）和57（糖基化）kDa，激活后 分子量为42和47 kDa。它的作用目标是纤维胶原蛋白（fibrillar collagens）。基质金属蛋白酶-1与风湿性关 节炎（结缔组织降解）、牙周病（periodontal diseases）和肿瘤发展转移有关；基质金属蛋白酶-1缺失将导致 肌肉骨骼综合种（musculoskeletal syndrome）。基质金属蛋白酶1的活性检测通过荧光共振能量转移法 （Fluorescence resonance energy transfer；FRET），即传递激发状态的能量由处于较短波长的供体（donor） 到覆盖供体波长的受体（acceptor），使得距离依赖性反应的供体的散发光子淬灭（quench）。基于多肽底物 PLGLAR两端标记的供体荧光探针7-甲氧基香豆素（7-methoxycourmarin）受到另一个受体基团二硝基苯二 氨基异丁酰[N-3-（2,4-dinitrophenyl）-L-α-β-diaminopropionyl；Dap]的抑制而荧光淬灭（quench）。在特异 性抑制剂GM1489（N-[(2R)-2-(Carboxymethyl)- 4-methylpentanoyl]-L-tryptophan-(S)-methylbenzylamide）存 在与否的条件下，一旦多肽的Gly-Leu键受到MMP1水解，释放出具有强烈荧光的7-甲氧基香豆素多肽片段， 据此根据其荧光强度（激发波长330nm，散发波长400nm）的变化，来定量测定基质金属蛋白酶1的特异活 性。

产品内容 清理液（Reagent A） 120 毫升 裂解液（Reagent B） 10 毫升 缓冲液（Reagent C） 6 毫升 底物液（Reagent D） 100 微升 标准液（Reagent E） 100 微升 专性液（Reagent F） 200 微升 产品说明书 1 份